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你所不知道的细菌培养的常用试剂

点击次数:99 发布时间:2020-07-31
  一、与颜色反应有关的试剂
  1、斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液).用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色.
  2、班氏糖定性试剂:为蓝色溶液.和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀.用于尿糖的测定.
  3、双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液).用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀.如待测中存在蛋白质,则呈现紫色.
  4、苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀.用于检测脂肪.可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色).
  5、二苯胺:用于鉴定DNA.DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色.
  6、甲基绿:用于鉴定DNA.DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色.
  7、碘液:用于鉴定淀粉的存在.遇淀粉变蓝.
  8、龙胆紫溶液:(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色体着色,可将染色体染成紫色,通常染色3~5分钟.(也可以用醋酸洋红染色,可将染色体染成红色)
  9、伊红—美蓝试剂:大肠杆菌鉴定,与其中有机酸反应产生深紫色,有金属光泽.
  10、结晶紫染液:用于自生固氮微生物的鉴定,染色,利于观察.
  11、重铬酸钾:酸性条件下与酒精反应,由橙红变为灰绿.
  12、溴麝香草酚蓝:与二氧化碳反应由蓝变绿,在变黄.
  13、健那绿:与线粒体反应,将线粒体染成蓝绿色.
  14、甲基绿:与DNA反应,将DNA染成绿色.
  15、吡罗红:与RNA反应,将RNA染成绿色.
  二、作为溶剂的试剂
  1、酒精在不同实验中的作用
  (1)50%的酒精溶液:在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色.
  (2)75%的酒精溶液:用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性.低于这个浓度,酒精的渗透脱水作用减弱,杀菌力不强;而高于这个浓度,则会使细菌表面蛋白质迅速脱水,凝固成膜,妨碍酒精透入,削弱杀菌能力.75%的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等.
  (3)95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA.用于DNA的粗提取实验.
  (4)95%的酒精溶液和15%的盐酸等体积混合可用于解离根尖.用于植物根尖分生区有丝分裂的实验观察,作为解离液可以将植物细胞分离开.
  2、丙酮(酒精):用于提取叶绿体中的色素.使色素在有机溶剂丙酮中溶解,便于溶解.
  3、层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开.
  4、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血.用于DNA的粗提取实验.
  5、氯化钠溶液:
  (1)可用于溶解DNA.当氯化钠浓度为2mol/L、 0.015mol/L时DNA的溶解度较高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度较高.
  (2)浓度为0.9%时可作为生理盐水.
  (3)高浓度食盐:选择培养基,金黄色葡萄球菌可以生存.
  三、作为培养基的成分
  1、青霉素:选择培养基,使霉菌,酵母菌可以生存,杀死细菌和放线菌.
  2、蛋白胨:微生物培养基中的C源、N源和生长因子,作为培养异养型微生物的原料.
  3、琼脂:固体培养基成分;生长素生理功能(温特实验)
  四、育种中使用的试剂
  1、胰蛋白酶:可用来分解蛋白质,可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散.
  2、纤维素酶、果胶酶:可用于植物细胞培养时分解组织使组织细胞分散.
  3、秋水仙素:人工诱导多倍体试剂.用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制正在分裂的细胞纺锤体的形成.
  4、氯化钙:增加细菌细胞壁的通透性(用于基因工程的转化,使细胞处于感受态)
  5、细胞工程促溶剂:
  (1)PEG(聚乙二醇):动物细胞及植物细胞工程中,用于细胞的融合.
  (2)灭活(仙台)病毒:动物细胞工程中,用于细胞的融合.
  6、硫酸二乙酯:生物人工诱变剂,可以导致生物基因突变.
  7、亚硝酸(盐):
  (1)化学致癌因子,导致细胞癌变.
  (2)生物人工诱变剂,可以导致生物基因突变.
  五、其他
  1、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率.(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)
  2、蔗糖
  (1)3%的蔗糖溶液、3%的可溶性淀粉溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验.
  (2)植物组织培养的人工合成培养基的原料之一.
  (3)0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验.
  3、色素提取:
  (1)二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分.
  (2)碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏.
  4、过氧化氢溶液:
  (1)用来作为验证酶的高效性实验
  (2)一定浓度的该溶液可以作为消毒剂,有一定的腐蚀性.
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