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PCR仪反应的三个主要步骤简析

点击次数:40 发布时间:2020-12-14
   PCR仪的PCR技术是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。优点是特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等。能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA的片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR仪几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。
  PCR仪的PCR反应包括三个主要步骤:
  1.Denaturation
  是将DNA加热(至90-95℃)变性,将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板.
  2.Annealing of primers
  是令Primers于一定的温度下(冷却至55-60℃)附着于模板DNA两端。
  3.Extension of primers
  在DNA聚合酶e.g.Taq-polymerase的作用下(加热至70-75℃)进行引物的延长Extension of primers及另一股的合成。
  PCR最早设想核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术。经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因。
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