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凝胶成像仪“切胶”时要注意什么?

点击次数:100 发布时间:2021-08-21
   凝胶成像仪的凝胶成像系统灵敏度越来越高,自动化程度也更高,设计也更加人性化,逐渐变得像傻瓜照相机一般易用。另外,外型也更加小巧、时尚。凝胶成像系统的基本骨架是CCD照相机、暗室和分析软件。不过其功能不仅仅限于对琼脂糖凝胶进行成像,现在的成像仪趋向于多功能化,还适用于蛋白胶、发荧光的胶、印迹膜和菌落平板等应用。
  凝胶成像仪切胶操作时的注意事项如下:
  1.电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片需要洗净,总之一句话就是保证切下的带没有外源DNA污染。
  2.切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积,可以用相对比较薄的胶来做,只要够点样即可,也可采用薄而宽的梳子来跑胶。
  3.关于防护,在一般有机玻璃后就足够了,戴上防护面具以保护眼睛,如果戴树脂眼镜就可以了。要是非常害怕紫外照射,或者对于胶有特殊要求,例如要求不含EB,可以采用点marker和带刻度的尺子一起照相的方法来确定目的条带在胶上的位置进行切胶。
  4.按照正常程序点marker跑胶,然后切下有marker的胶,EB染色,紫外灯下与带刻度的尺子一起照相。由于要回收的带与marker间的相对位置已知,根据尺子来衡量未染色胶上目的带的位置即可。如果觉得很难判断,可以直接在marker边点少量的样,这样位置就容易确定了。
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