电泳仪关于核酸电泳技术的一些种类区分
点击次数:1304 更新时间:2022-06-26
电泳是电解质中带电粒子在电场作用下,以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象。利用这种现象对化学和生物化学样品进行分离的仪器称为电泳仪。20世纪30-40年代起,相继发展了多种基于抗对流载体的电泳仪。传统电泳仪由于受到焦耳热的限制,只能在低电场强度下进行电泳操作,分离时间长,分离效率低。20世纪80年代初,小内径毛细管用于电泳仪,由此产生了一种新型的毛细管电泳仪。
针对核酸电泳技术我们来做个介绍吧:
1.凝胶电泳
凝胶电泳是常用的一种蛋白表达分析技术。原理是根据检体中蛋白质分子量大小的不同,使其在电泳胶中分离。在大肠杆菌表达纯化外源蛋白的实验中,SDS-PAGE更是不可少的操作。该技术能检测蛋白的表达情况,以及分析目的蛋白的纯度等。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用于分离蛋白质较小分子核酸。琼脂糖凝胶电泳适用于分离同工酶及其亚型、大分子核酸等。
2.醋酸纤维素薄膜电泳
醋酸纤维薄膜电泳操作简单、快速、廉价。以醋酸纤维薄膜为支持物,由纤维素的羟基经乙酰化而制成。这种薄膜对蛋白质吸附小,能消除电泳中出现的“托尾”现象,具有分离速度快、样品用量小的特点,适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。应用于血清蛋白、血红蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖蛋白、甲胎蛋白、类固醇激素及同工酶等的分离分析中,尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低,但它具有简单、快速等优点。
3.等电聚焦电泳
等电聚焦电泳是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展。原理是在稳定的pH梯度中按等电点的不同来分离两性大分子。应用于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分,在区带电泳中分辨率好。常用的pH梯度支持介质有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等。
4.毛细管电泳
又称高效毛细管电泳。技术原理是以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的将液相分离,是一种利用电泳和电渗流的电动力学原理,在一种空芯的微小内径的毛细管中进行混合物的高效分离技术。毛细管电泳分类为毛细管自由溶液区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳及胶束毛细管电动力学色谱。