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探讨原子力显微镜与细胞固定技术

点击次数:56 发布时间:2023-01-12
   原子力显微镜是一种以检测探针与样品间相互作用为特征的扫描力显微镜,主要有附有针尖的微悬臂、压电扫描器、激光与光电检测器及反馈控制系统等构成。力敏感弹性微悬臂一端固定,另一端附有一微小的针尖,当针尖对固定在压电扫描器上的样品进行扫描时,随距离变化的针尖-样品间相互作用力会引起微悬臂变形,由激光源发出的一束激光照射到微悬臂的背面,并被反射到光电检测器上,通过反馈控制系统即可记录样品的表面形貌或样品-针尖间作用力等方面的信息,随着原子力显微镜技术的迅猛发展,它在细菌吸附研究中的应用日趋广泛,主要包括测定细菌表面形貌以及细菌与固相表面间的作用力。
  原子力显微镜在研究细菌吸附时,使用了多种固定细菌细胞的方法。根据细菌固定的位置,可将固定方法分为两类:一是细胞固定在支持物上,探针可以是氮化硅或硅探针,抑或是胶结有微米尺寸珠子的微悬臂,由于制作均质性探针受到材料的限制,因此研究细菌与不同固相界面间的相互作用也将受到制约;二是细胞固定在探针上,即细胞探针,此种固定方法弥补了前面一种方法的不足,可用于探究细胞探针与任何感兴趣的固相表面间的相互作用,但该技术的缺陷是细胞探针表面较大,成像的分辨率低,力测定值是探针与研究表面间微米水平接触区域的力效应的平均值,且很难获得准确的探针半径及细胞或胞外大分子的取向。另外,两类细胞固定技术都需要保持细胞的自然状态,且细胞固定力大于细胞与界面间作用力。
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